ELISA(酶联免疫吸附测定)是一种常用的实验技术,用于检测和定量样本中抗原或抗体的存在。其基本原理可以概括为以下几个步骤:
包被抗原/抗体:在ELISA板的孔中涂敷已知的抗体(用于检测抗原)或抗原(用于检测抗体),并通过孵育使其结合到固相基质上。
样本添加:将待测样本(如血清、血浆或其他生物样本)加入孔中。样本中的目标抗原或抗体会与已包被的抗体或抗原结合。
洗涤:通过洗涤步骤去除未结合的成分,减少背景噪声。
添加酶标记的二抗:加入一种与目标抗原或抗体特异性结合的酶标记的二抗。这种二抗会与样本中结合的抗原或抗体结合。
再次洗涤:去除未结合的二抗。
底物反应:向孔中添加底物,底物与酶反应生成可测量的信号(通常是颜色变化)。信号的强度与样本中目标物的浓度成正比。
结果测定:使用分光光度计等仪器测量反应产生的信号强度,从而定量分析样本中目标物质的浓度。
ELISA技术因其灵敏度高、特异性强、操作相对简单等优点,广泛应用于临床诊断、食品安全检测、疫苗研发等领域。
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