凝血酶原时间(PT)检测试剂盒(一期法)培养説明

凝血酶原时间(PT)检测试剂盒(一期法)

一、产品简介：

静脉血离体后至凝固所需的时间即为凝血时间,它是反映内源性凝血系统各凝血因子活性的筛选实验，凝血酶原时间(PT)是在待检血浆中加入过量的组织凝血活酶和钙离子，使凝血酶原转变为凝血酶，后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，计算缺乏血小板的血浆凝固所需的时间，以ISI为参考。

雅吉生物凝血酶原时间(PT)检测试剂盒(一期法)用于检测人、动物血液的血浆凝血酶原时间的测定，不仅反映凝血酶原水平，也反映因子V、VI、X和纤维蛋白原在血浆中的水平，是外源性凝血系统的筛选实验试剂盒。

该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

二、产品组成：

三、自备材料：

1、枸橼酸钠抗凝剂采血管、采血针、止血带

2、离心机、计时器或秒表、水浴锅

四、操作步骤(仅供参考)：

1、制备待测血浆︰取新鲜待测静脉血1.8ml，与0.2ml柠檬酸钠抗凝剂(109mM)按9:1轻轻颠倒混匀。(或用含有1/10体积的柠檬酸钠抗凝剂的塑料管或硅化玻璃管采血)

2、3000rpm(或2500g ）离心10~15min，收集上层液(缺乏血小板的血浆)，转移至塑料试管或离心管，以防止血小板被激活；同时应设正常对照血浆。

3、取待测血浆0.07ml与PT凝血活酶溶液0.14ml，分别置于37℃水浴中，温育3min。

4、将待测血浆(包括正常对照血浆)与PT凝血活酶溶液混合，置于37℃水浴3~5min ,期间轻轻混匀数次。记录凝固时间。重复2~3次取平均值，即为凝血酶原时间(PT)。

凝血酶原时间比值(PTR)=待检血浆的PT/正常参比血浆的PT

国际标准化比值(INR)=PTR^ISI

参考区间：

PT值:10~14s，待测者的测量值较正常对照值延长3s以上具有临床意义。以上值仅供参考，由于试剂、人群、仪器等不同，会导致参考值不同，建议各实验室建立自己的参考范围。

ISI值:<2.0s。

五、注意事项：

1、以上操作，应同时测定正常对照。

2、采血必须使用一次性塑料注射器或硅化玻璃注射器，贮血必须使用塑料试管或硅化玻璃管，不宜使用普通玻璃容器，避免凝血因子活化。

3、抽血要顺利，抗凝要充分。样本采集应避免溶血及组织污染。

4、不宜使用肝素、EDTA或草酸盐作为抗凝剂。

5、分离血浆应在2500g 离心10min以上，务必去除血小板。

6、获得样本后应及时检测，一般室温不应超过1h，4℃不应超过4h ，-20℃可保存2周。

7、血浆预温不宜超过5min，PT凝血活酶溶液预温不宜超过15min。

8、应精确控制孵育温度在37±1℃，过高或过低均会使PT延长。

9、操作时光线要充足，凝血酶原时间的终点计算以出现混浊的初期凝固为准。10、红细胞比容(Hct)不在20～55%时，抗凝剂与血液的比例应按以下公式调整：                         

抗凝剂(ml)=(100%-Hct)×血液(ml)×0.00185。

11、本产品仅用于科研领域，不得用于临床诊断或其他用途。

12、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

六、有效期：6个月有效。4℃运输，4℃保存。