Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶(32U/ul)试剂

Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶(32U/ul)试剂与Bst 2.0 DNA 聚合酶和Bst DNA 聚合酶大片段相

比，Bst 3.0 DNA聚合酶具有更佳的等温扩增活性和更强的

逆转录活性。无论以DNA还是RNA为模板，该酶都具有5’-3’

的DNA聚合酶活性和强烈的链置换活性，但该酶5’-3’和3’-5’

的外切酶活性缺失。

在以RNA为模板的LAMP实验中，可实现单酶系统反应。

该酶在60-65°C之间具有很好的反转录活性，可有效解决具

有二级复杂结构的RNA模板的反转录，而Bst 2.0 DNA 聚合

酶和Bst DNA 聚合酶大片段无此活性。

组分

名称 16KU

Bst 3.0 DNA/RNA

Polymerase(glycerol free) (32 U/μl)

500 μl

10×Isothermo Buffer(Mg2+ free) 20 ml

100 mM Mg2+ 20 ml

Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶(32U/ul)试剂注意：该酶制品中不含有甘油，可用于建立冻干体系。

单位定义：

一个活力单位即在 65°C 条件下，30 分钟内催化 10 nmol

dNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。

储存：-20℃ 可保存 3 年。

典型的 LAMP 反应

1. 按以下组分配制 LAMP 反应液

Bst 3.0 DNA/RNA Polymerase (32 U/μl) 0.05~0.25 μl

10×Isothermo Buffer(Mg2+ free) 2.5 μl

100 mM Mg2+

 X μl

dNTP Mixture (10 mM each) 3.5 μl

模板 DNA/RNA 10ng~1 μg

*10X Primers 2.5μl

ddH2O Up to 25 μl

*10X Primers：16 µM FIP/BIP, 2 µM F3/B3, 4 µM LoopF/B each。

2. 65°C 30~60min; 85°C 5min 失活。

使用注意事项：

(1) Mg2+的使用浓度为 4~10 mM 浓度，Isothermo Buffer

中没有 Mg2+，通常情况下，在 6-8 mM Mg2+条件下可获得

较好的 LAMP 结果。

(2) 有文献报道加入 Tte Uvrd 解旋酶可改善 LAMP 的效果。

(3) 使用无模板 DNA 作为对照检测扩增的特异性。