简要描述:RAPA HiFi DNA Polymerase(5U/ul)试剂,雅吉生物是一家生物企业主营ATCC细胞,细胞系,原代细胞和培养试剂,重组蛋白,ELISA试剂盒、抗体、荧光定量PCR检测试剂盒
详细介绍
RAPA HiFi DNA Polymerase(5U/ul)试剂聚合酶,其来源于高保真DNA聚合酶,并加入了增强的延伸结构,使其具有超保真性能(~280倍Taq)
、长片段扩增能力、高产量。长片段扩增能力,使用该酶可轻松扩增8kb的基因组DNA、20kb的λDNA、8kb的cDNA。
该酶具有6kb/min以上的延伸速度。该酶具有5’-3’的聚合酶活性、强3’-5’的外切酶活性,产物为平末端。
主要特征
超保真扩增:~280倍Taq的保真性能,是载体构建、点突变、NGS模板扩增、基因合成的最佳用酶。
快速扩增:具有6kb/min的扩增能力。
长片段扩增:质粒、λDNA 等简单模板可以有效扩增>20 kb,基因组可以有效扩增>8 kb,cDNA可以有效扩增>8kb。
组分
组分名称500U
RAPA HiFi DNA Polymerase(5 U/μl)100 μl
2xRAPA HiFi Buffer1 ml×5
单位定义
一个活力单位即在在74°C条件下,30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
储存
长期储存置于-20°C以下,可保存2年;短期使用置于4°C(3个月)保存。
RAPA HiFi DNA Polymerase(5U/ul)试剂恒温扩增使用策略及实例展示
应用实例2:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
应用实例3: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
应用实例1:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)
以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起
始前,下图为 65 度反应 30min 后。
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