RAPA3G DNA Polymerase试剂

RAPA3G DNA Polymerase试剂为第三代DNA聚合酶，具有5'-3'外切酶活性，不具有3'-5’外切酶活性，其具有最高的杂质耐受性（对乙醇、胍盐、肝素具有

的耐受性），因此对于纯度较差的DNA模板，该酶仍然可以获得理想的实验结果。

RAPA3G DNA聚合酶为化学法修饰的HotStart版本，其在50℃以下100%无活性，只有95℃条件下加热5min后才能恢复酶的

活力。因此该系统可以有效抑制非特异性PCR扩增，极大的提高了PCR扩增特异性和灵敏度。该酶配有的反应缓冲液，

可在宽范围中得到良好的扩增结果、检测灵敏度更高、信号更强。

主要特征

快速扩增：具有6kb/min的扩增能力，1kb片段可在25min内完成扩增.

杂质高耐受性：全血、血清、培养细胞、尿液等样本直接进行PCR扩增，无需核酸纯化。

高特异性：采用HaiGene专有热启动技术，50°C以下无活性，仅有95°C加热5min才能恢复酶活。

长片段扩增：质粒、λ DNA 等简单模板可以有效扩增>20 kb，基因组可以有效扩增>8 kb，cDNA可以有效扩增>8kb。

组分

组分名称1000U

HotStart RAPA3G DNA Polymerase (10U/μl)100 μl

5×HotStart RAPA3G Buffer1 mlx4

100mM Mg2+1 ml

RAPA3G DNA聚合酶对抑制物耐受性

SDS0.01%胍盐0.25%

乙醇5%全血15%

肝素0.1IU/ml血清15%

Trizol0.5%血浆2%

血红蛋白30μM尿液5%

50μl体积建议添加的样品量

抗凝全血2.5 μl培养细胞>100个

血清2.5 μl组织0.1mg

尿液2.5 μl毛发囊1-3个

血浆1 μlgDNA

1-400ng

植物叶片2mmcDNA1-400ng

植物粗提物2-4 μl质粒0.1-10ng

单位定义

一个活力单位即在在74°C条件下，30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。

储存

-20℃可保存3年。

RAPA3G DNA Polymerase试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。