简要描述:SD DNA Polymerase (10U/ul)试剂,雅吉生物是一家生物企业主营ATCC细胞,细胞系,原代细胞和培养试剂,重组蛋白,ELISA试剂盒、抗体、荧光定量PCR检测试剂盒
详细介绍
SD DNA Polymerase (10U/ul)试剂是一种新型的Taq DNA聚合酶,该酶具有Bst聚合酶的强烈的链置换活性和类似Taq DNA聚合酶的耐热性。SD DNA 聚合酶可耐受90℃高温(短暂耐受92℃),且具有5'-3'聚合酶活性、5'-3'链置换活性,无外切酶活性,扩增速度2kb/min,最佳反应温度为70℃,这些特征使得该酶广泛适用于热变性PCDR (Polymerase Chain Displacement Reaction)、LAMP反应、长片段扩增、富含GC片段扩增,还可用于全基因组测序(WGA)、单细胞测序和NGS建库等领域。
SD DN 聚合酶在搭配Taq DNA聚合酶的组合下可进行TaqMan探针的切割,用于qPCDR的扩增。这种qPCDR 的新型方案将槽式PCR的高灵敏特性放置于单管、一步扩增完成,这种检测策略比qPCR灵敏度高10-100 倍,并且用时更短。
单位定义
1unit指在70°C条件下,30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
应用
等温扩增、LAMP、热变性LAMP、tHDA和RCA、PCDR、全基因组测序、单细胞测序、NGS文库构建。
储存
-20°C可保存2年。
SD DNA Polymerase (10U/ul)试剂恒温扩增使用策略及实例展示
应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
应用实例3:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)
以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起
始前,下图为 65 度反应 30min 后。
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