简要描述:Therminator DNA Polymerase (2 U/μl)试剂,雅吉生物是一家生物企业主营ATCC细胞,细胞系,原代细胞和培养试剂,重组蛋白,ELISA试剂盒、抗体、荧光定量PCR检测试剂盒
详细介绍
Therminator DNA Polymerase (2 U/μl)试剂来源于Thermococcus species 9°N-7中的一种,其是9°N DNA聚合酶突变体,无3’-5’ exo活性,该突变体具有较强的掺入修饰底物的能力,如:ddNTP、rNTP 和acyNTP,因此其适用于核糖核酸置换法DNA测序、ddNTP或acyNTP的链终止法测序或SNP分析。
主要特征和应用
提高了修饰核苷酸的掺入能力
部分核糖核酸置换法测定 DNA 序列
ddNTP 或 acyNTP 的链终止法用于测序或 SNP 分析
单位定义
一个活力单位即在在72°C条件下,30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
储存
-20℃可保存2年。
Therminator DNA Polymerase (2 U/μl)试剂恒温扩增使用策略及实例展示
应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
应用实例3:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)
以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起
始前,下图为 65 度反应 30min 后。
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