6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit试剂

6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit试剂全新一代MLV7反转录酶为RNase H活性缺失型的聚合酶，并含有的快速合成功能域，其将MLV的反转录速度提高了3-4倍

。除此外，MLV7为耐热型，可耐受50℃ 高温反应，在60℃ 条件下仍然具有30%以上活性，利于打开RNA二级结构，从而提高

复杂RNA模板的扩增性能。

基于MLV7开发的，采用稳定高效的反转录预混体系5×Fast RT MasterMix进行

RNA的反转录反应，使用时只需加入模板、引物和RNase Free H2O 即可，大大简化了操作过程、提高了效率、减少了操作

过程中的人为误差。优化的反转录Buffer系统，可以获得更高产量的cDNA，从而提高后续检测的灵敏度。合成的第一链

cDNA可广泛用于2nd Strand的合成、杂交、PCR扩增、Real-Time PCR反应等。

组分

组分名称数量

5×Fast RT MasterMix400 μl

20XOligo dT(25)&Random Primer100 μl

Rnase Free H2O1 ml×2

注：1.该制品可有效反转录mRNA、tRNA、LncRNA、ncRNA。

  2. 该制品不可反转录microRNA。

主要特征

采用全新的MLV7，整个反转录过程只需6min

50℃进行反转录的MLV反转录酶，能更好的转录含有复杂高级结构的RNA模板

高效便捷的反转录预混体系

反转录引物为Random Primer和Oligo dT Primer预混的RT Primer Mix，可更好的合成样品中的各种cDNA

储存

请置于-20°C，可保存2年；避免反复冻融。

性能展示

1.时间与产量

以1μg Hela Total RNA作为起始反转录模板，分别使用6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit 和传统反转录试剂盒（35min），

 对TGFβ、IL-6和GAPDH 3个基因进行qPCR检测，结果显示，6min Fast 1 st cDNA Synthesis Kit获得的cDNA产量与传统

反转录试剂盒相当，无显著差异.

储存

2-8℃避光保存，可保存2年。

6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

应用实例3：A3825-01 红黄变色反应（肉眼观察）

以 体外转录 RNA 为模板，1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前，下图为 65 度反应 30min 后。

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