简要描述:Strep-Tactin XT Resin试剂,雅吉生物是一家生物企业主营ATCC细胞,细胞系,原代细胞和培养试剂,重组蛋白,ELISA试剂盒、抗体、荧光定量PCR检测试剂盒
详细介绍
Strep-Tactin XT Resin试剂琼脂糖凝胶FF 是一种将Strep-Tactin XT共价交联在琼脂糖凝胶微球上,形成的生物亲和层析分离介质。该纯化介质主要用于
纯化Strep tag II 或Twin strep tag标签蛋白。Strep tag II 标签为8 个氨基酸的小标签(WSHPQFEK),由于标签小,
仅为1kDa 左右,一般不影响融合后蛋白质的结构和功能,常用于融合表达蛋白质的检测和纯化。
由于Strep-Tacin XT对Strep tag II 标签具有高度特异性,一步纯化就能获得高纯度的蛋白质样品。Strep tag II 标签蛋白与凝胶
结合后可使用脱硫竞争方式进行洗脱,该洗脱方式比较温和,对蛋白影响极小。 由于Strep-Tactin对Strep tag II
标签具有很强的吸附能力,在生物的洗脱过程中不易洗脱,造成洗脱效率较低。可以通过在脱硫洗脱液中添加25mM NaOH
来提高蛋白回收效率,而添加NaOH后会造成Strep-Tactin从填料上脱落,进而污染纯化蛋白。
本产品为升级的Strep-Tactin XT,其可耐受高浓度的NaOH洗脱(0.5M),除此外Strep-Tactin XT可耐受1%SDS、6M尿素
,因此使用该填料可以在变性条件下纯化标签蛋白。
组分
50%的悬浮液(20%乙醇)。
优势
Strep-Tactin Resin缺点Strep-Tactin XT Resin优点
(1)常规3mM D-biotin洗脱,洗脱效率较低。(1) 可采用多种洗脱模式;高效的洗脱率,灵活的洗脱条件。
(2)填料再生成本高,需要HABA再生,再生时间长,再生后填料结合能力下降较多,一般难以再生3次以上。(2)方便的填料再生方式,通常可重复使用10次以上。
(3)不能在变性条件下纯化蛋白。(3)可以在变性条件下纯化蛋白。
(4)洗脱蛋白中会有残留脱落的Strep-Tactin蛋白(4)洗脱产物中不含有脱落蛋白,获得最高纯度的蛋白制品。
主要技术指标
基质 4%琼脂糖凝胶微球PH耐受性 2~13
配基 Strep-Tactin XT耐盐性 <2M NaCl
配基密度 >5 mg/mlSDS耐受性 <2%
粒径 45~165 µM(还原剂耐受性 <10mM DTT,<0.1% beta-ME
结合蛋白量 ≥6 mg/ml变性剂耐受性 <6M尿素
储存
4°C保存,切勿冻存。
Strep-Tactin XT Resin试剂恒温扩增使用策略及实例展示
应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
应用实例3:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)
以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起
始前,下图为 65 度反应 30min 后。
雅吉生物是一家生物企业主营ATCC细胞,细胞系,原代细胞和培养试剂,重组蛋白,ELISA试剂盒、抗体、荧光定量PCR检测试剂盒更多产品欢迎咨询。
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